Esito di pazienti con carcinoma uroteliale micropapillare a seguito di cistectomia radicale: l'amplificazione erbb2 (her2) identifica i pazienti con esito sfavorevole | patologia moderna

Esito di pazienti con carcinoma uroteliale micropapillare a seguito di cistectomia radicale: l'amplificazione erbb2 (her2) identifica i pazienti con esito sfavorevole | patologia moderna

Anonim

Soggetti

  • Prognosi
  • Oncologia chirurgica
  • Tumore urologico

Astratto

Il carcinoma uroteliale micropapillare presenta amplificazione del recettore del fattore di crescita epidermico umano, ERBB2 ( HER2 ) e sovraespressione del prodotto proteico ERBB2. Il significato clinico di questo deve ancora essere stabilito. L'obiettivo di questo studio era di esaminare l'amplificazione di ERBB2 e l'espressione proteica nel carcinoma uroteliale micropapillare e il carcinoma uroteliale tipico associato allo stadio trattato con cistectomia radicale per valutare la frequenza di amplificazione ed espressione proteica e determinare l'associazione con la sopravvivenza specifica del cancro. Sono stati esaminati il ​​materiale patologico e i dati provenienti da pazienti sottoposti a cistectomia presso la Mayo Clinic tra il 1980 e il 2008. Sono state valutate l'amplificazione ERBB2 mediante ibridazione in situ a fluorescenza (FISH) e l'espressione proteica mediante immunoistochimica. Sono stati usati modelli di regressione dei rischi proporzionali univariati e multivariati per valutare le associazioni tra amplificazione ERBB2 ed espressione proteica e sopravvivenza. L' amplificazione di ERBB2 è stata identificata in 9 (15%) di 61 carcinomi micropapillari rispetto al 9 (9%) di 100 carcinomi uroteliali. Nei pazienti con carcinoma micropapillare, l'amplificazione di ERBB2 era associata a un rischio triplicato di morte per cancro. L' amplificazione di ERBB2 (hazard ratio 4, 3; P = 0, 0008) è rimasta associata ad un aumentato rischio di morte per cancro alla vescica tra i pazienti con carcinoma uroteliale micropapillare all'analisi multivariata. L'associazione di sopravvivenza specifica per cancro e l'amplificazione di ERBB2 non è stata osservata in pazienti con carcinoma uroteliale. L'immunoistochimica ERBB2 era correlata all'amplificazione ERBB2 ma non vi era alcuna associazione tra espressione e sopravvivenza della proteina ERBB2. L' amplificazione di ERBB2 è più frequente nel carcinoma uroteliale micropapillare rispetto al carcinoma uroteliale tipico e i pazienti con carcinoma micropapillare che hanno l'amplificazione ERBB2 hanno una sopravvivenza specifica del cancro peggiore rispetto a quelli che non lo fanno. L'identificazione dell'amplificazione di ERBB2 nel carcinoma micropapillare potrebbe fornire importanti informazioni prognostiche e possibilmente fornire un ruolo per la terapia mirata ERBB2.

Principale

Il carcinoma uroteliale micropapillare è una variante unica del carcinoma uroteliale che comprende <6% di tutti i tumori della vescica. 1, 2, 3 Diversi studi hanno dimostrato che il carcinoma uroteliale micropapillare viene diagnosticato in una fase più avanzata ed è associato a esiti avversi rispetto al carcinoma uroteliale tipico. 4, 5, 6, 7, 8 Tuttavia, uno studio recente ha scoperto che, sebbene i pazienti con carcinoma uroteliale micropapillare si presentassero ad uno stadio più elevato rispetto ai pazienti con carcinoma uroteliale tipico, i risultati a seguito di cistectomia radicale non erano diversi se abbinati allo stadio e ad altre variabili clinicopatologiche . 9

Oltre alle caratteristiche istologiche uniche, gli studi hanno dimostrato che il carcinoma uroteliale micropapillare mostra un'amplificazione del recettore del fattore di crescita epidermico umano ( ERBB2 o HER2 ) in oltre il 40% dei casi. 10 ERBB2 è un recettore del fattore di crescita transmembrana di tipo I che attiva le vie di segnalazione intracellulari in risposta a segnali extracellulari. Fu coinvolto per la prima volta nella patogenesi del carcinoma mammario umano 25 anni fa. 11 Nei pazienti con carcinoma mammario, l'amplificazione di ERBB2 è associata a prognosi sfavorevole. 12 Tuttavia, la terapia mirata a ERBB2 con l'anticorpo trastuzumab anti-ERBB2 ha comportato una sopravvivenza significativamente più lunga se combinato con la chemioterapia standard in pazienti i cui tumori al seno mostrano amplificazione ERBB2 rispetto ai pazienti in cui il tumore non ha amplificazione ERBB2 . 12, 13 L' amplificazione di ERBB2 è stata identificata in altri tipi di tumore, sebbene il suo ruolo nel trattamento di questi tumori maligni sia ancora da definire. 10, 14, 15, 16

Sebbene l'amplificazione di ERBB2 sia stata identificata nel carcinoma uroteliale micropapillare, la sua frequenza e associazione con gli esiti non sono state stabilite nei pazienti sottoposti a chirurgia curativa. L'obiettivo di questo studio era di esaminare l'amplificazione ERBB2 e l'espressione proteica in una serie consecutiva di pazienti con carcinoma uroteliale micropapillare sottoposti a cistectomia radicale per determinare la frequenza di amplificazione ed espressione proteica e la loro associazione con gli esiti. Inoltre, ERBB2 e lo stato delle proteine ​​sono stati confrontati tra pazienti con carcinoma uroteliale micropapillare e pazienti con carcinoma uroteliale tipico abbinato alle variabili cliniche e patologiche prognostiche.

Materiali e metodi

Dopo che è stata ottenuta l'approvazione del Consiglio di revisione istituzionale, abbiamo esaminato il registro della cistectomia della clinica Mayo dei pazienti sottoposti a cistectomia radicale presso la nostra istituzione tra il 1980 e il 2008. La cistectomia radicale è stata eseguita da vari chirurghi utilizzando tecniche standard. I vetrini e i blocchi tissutali vengono mantenuti permanentemente su tutti i pazienti e tutti i campioni di cistectomia dal 1980 al 2008 sono stati rivisti da un patologo urologico e sono stati identificati 61 casi di carcinoma uroteliale micropapillare. L'inclusione di casi nello studio ha richiesto qualsiasi componente micropapillare in un carcinoma uroteliale. Questi 61 casi sono stati abbinati per stadio, età del paziente, stato ECOG, ricevimento di chemioterapia perioperatoria e decennio di chirurgia, con 100 casi di carcinoma uroteliale tipico. Tutti i casi sono stati rivisti una seconda volta da due patologi (WRS e JCC) in modo indipendente e accecati dalle diagnosi precedenti per garantire la diagnosi appropriata del carcinoma micropapillare. In questo studio è stato raggiunto un consenso su tutti i casi. La stadiazione ha seguito la classificazione TNM della 7a edizione del Comitato congiunto americano per il cancro / Union Internationale Contre le Cancer del 2010. 17 Poiché tutti questi campioni sono stati ottenuti prima del sistema di stadiazione del 2010, la stadiazione retrospettiva è stata eseguita come descritto in precedenza. 18 In breve, la classificazione di pT1 e pT2 è stata ottenuta mediante revisione microscopica di vetrini poiché i parametri di stadiazione si basano su caratteristiche microscopiche. Nel caso di tumori pT3, i vetrini di tessuto (in cui sono mantenute le caratteristiche grossolane della vescica e del tumore) sono stati esaminati macroscopicamente e la presenza o l'assenza di una lesione grossolana è stata determinata e i risultati confermati al microscopio.

La natura retrospettiva di questo studio ha precluso un protocollo di follow-up postoperatorio standardizzato in tutti i pazienti. Tuttavia, il follow-up dopo la cistectomia radicale presso il nostro istituto è stato generalmente raccomandato trimestralmente per i primi 2 anni dopo l'intervento chirurgico, semestralmente per i successivi 2 anni e successivamente ogni anno in pazienti senza evidenza di recidiva della malattia. Lo stato vitale è stato identificato dai certificati di morte o dalla corrispondenza del medico. Per i pazienti seguiti altrove, il registro della cistectomia della Mayo Clinic monitora gli esiti ogni anno per corrispondenza con il paziente e il medico curante.

Sono stati riportati dati demografici clinicopatologici per i pazienti con carcinoma micropapillare e confrontati con un gruppo di pazienti con carcinoma uroteliale tipico in base a età, sesso, stadio T, stadio N, stadio di prestazione ECOG, ricevimento di chemioterapia neoadiuvante, chemioterapia postoperatoria e radioterapia stato del margine chirurgico.

Metodi di prova ERBB2 e criteri interpretativi

ERBB2 (HER2) mediante ibridazione in situ a fluorescenza (FISH) . I test ERBB2 approvati dalla Food and Drug Administration (FDA) degli Stati Uniti sono stati utilizzati per FISH. L' amplificazione di ERBB2 è stata valutata in sezioni da 5 μ m fissate in formalina e incluse in paraffina usando il kit di sonde DNA HER-2 PathVysion (sonde HER2 e centromere 17; Abbott Molecular, Des Plaines, IL, USA), come descritto. Sono state utilizzate sezioni di tumori interi da campioni di cistectomia e l'intera sezione è stata scansionata da tecnici citogenetici certificati per rilevare eventuali sottopopolazioni di cellule amplificate. Sono stati segnati un totale di 60 nuclei rappresentativi del tumore invasivo, con una valutazione complessiva eseguita da un citogenetista. 19, 20 Un campione con un rapporto ERBB2 / centromero 17 ≥2, 0 in cellule invasive è stato classificato come ERBB2 amplificato secondo i criteri sviluppati per la classificazione delle anomalie di ERBB2 e centromero 17 come precedentemente descritto. 19, 21

I guadagni e le perdite del cromosoma 17 sono stati determinati usando modelli di segnale di centromero 17 basati sulla metodologia e sui tagli che abbiamo precedentemente convalidato usando due grandi set indipendenti di carcinoma mammario. Di conseguenza, la polisomia 17 (guadagno) è stata definita come segnale a tre centromeri 17 in oltre il 30% dei nuclei; la monosomia 17 (perdita) è stata definita come un segnale di centromero 17 in oltre il 60% dei nuclei; e tutti gli altri casi sono stati considerati normali. 20 Entrambi i valori soglia distinguono chiaramente i tumori polisomici e monosomici del cromosoma 17 dai tumori senza anomalie del cromosoma 17 centromero. 22 Tutte le soglie di categorizzazione sono state selezionate per ridurre il tasso di risultati falsi positivi per l'amplificazione dei geni, la cancellazione dei geni e la perdita o il guadagno dei cromosomi. Il controllo di qualità del test FISH ERBB2 viene regolarmente valutato in base alle linee guida standard CAP e American College of Medical Genetics. 20, 23, 24, 25

Eterogeneità ERBB2 di FISH

Seguendo le linee guida del carcinoma mammario CAP, 20 un campione è stato considerato avere un'amplificazione ERBB2 eterogenea se ci fossero> 5% ma <50% infiltranti cellule tumorali con un rapporto ERBB2 / centromero 17> 2, 2 (i risultati erano gli stessi per un punto di taglio 2, 0) . Un rapporto ERBB2 / centromero è stato determinato separatamente per la sottopopolazione amplificata e non amplificata di ciascun tumore eterogeneo. Il rapporto primario ERBB2 / centromero 17 per ciascun caso eterogeneo è stato determinato calcolando un rapporto medio tra le sottopopolazioni amplificate e non amplificate ponderato dalla percentuale che ciascuna sottopopolazione comprendeva l'intero tumore. I tumori eterogenei di ERBB2 erano ulteriormente caratterizzati dalla distribuzione della sottopopolazione amplificata, cioè raggruppata (cellule amplificate adiacenti l'una all'altra, tendenti ad essere disposte in gruppi) contro diffusa (cellule amplificate sparse tra le cellule non amplificate e distribuite in modo relativamente uniforme in tutto il tumore).

L'immunoistochimica ERBB2 è stata eseguita utilizzando HercepTest (Dako) secondo le raccomandazioni del produttore. La colorazione immunoistochimica è stata valutata secondo le raccomandazioni delle linee guida dell'American Society of Clinical Oncology / College of American Pathology. 24

Analisi statistica

I test di somma dei ranghi e χ 2 di Wilcoxon sono stati usati per confrontare le variabili tra i gruppi. Per l'analisi della sopravvivenza, la variabile di esito era la sopravvivenza specifica del cancro, definita come il tempo dall'intervento chirurgico alla morte correlato al cancro dell'indice ed è stata censurata alla data del decesso a seguito di complicanze postoperatorie o altre cause non maligne. La sopravvivenza specifica del cancro è stata stimata usando il metodo Kaplan-Meier e confrontata con il test log-rank. Le associazioni di caratteristiche con il tempo fino alla morte per carcinoma della vescica sono state valutate utilizzando modelli di regressione dei rischi proporzionali di Cox e sintetizzate con rapporti di rischio (HR) e intervalli di confidenza al 95% (CI). Tutti i valori P sono bilaterali, con una P <0, 05 considerata statisticamente significativa. Le analisi sono state condotte in SAS versione 9.1 (SAS Institute, Cary, NC, USA).

risultati

Le caratteristiche clinicopatologiche dei pazienti con carcinoma micropapillare e carcinoma uroteliale tipico sono elencate nella Tabella 1. C'erano 61 pazienti nel carcinoma micropapillare (Tabella 2) e 100 con carcinoma uroteliale. Il follow-up mediano di tutti i pazienti è stato di 12, 8 anni. I gruppi di carcinoma uroteliale micropapillare e carcinoma uroteliale sono stati abbinati in modo tale che non vi fossero differenze statistiche tra le coorti in termini di età, sesso, stato delle prestazioni ECOG, durata del follow-up, stadio o ricevimento della chemioterapia perioperatoria (neoadiuvante). Per quanto riguarda il trattamento postoperatorio, 14 (23%) pazienti con carcinoma micropapillare hanno ricevuto la chemioterapia rispetto al 41 (25%) dei pazienti con carcinoma uroteliale tipico e le radiazioni postoperatorie sono state somministrate a 1 (1, 6%) con carcinoma micropapillare e 2 (1, 2% ) pazienti con carcinoma uroteliale tipico. Nei casi di carcinoma uroteliale micropapillare, la maggior parte dei casi (55 su 73; 75%) era composta interamente da carcinoma micropapillare e l'intervallo del componente del carcinoma micropapillare nei rimanenti casi variava dal 5 al 90%. L'altro componente in questi casi era il carcinoma uroteliale tipico.

Tabella a grandezza naturale

Tabella a grandezza naturale

L' amplificazione di ERRB2 è stata identificata in 9 (15%) di 61 carcinoma uroteliale micropapillare rispetto al 9 (9%) di 100 carcinomi uroteliali tipici (Figura 1). Non è stata identificata l'eterogeneità dell'amplificazione ERBB2 . I pazienti con carcinomi micropapillari amplificati con ERBB2 avevano maggiori probabilità di avere linfonodi positivi al momento della cistectomia rispetto ai pazienti con carcinomi micropapillari non amplificati, rispettivamente 78% contro 48%, ma ciò non ha raggiunto significatività statistica ( P = 0, 078). Non ci sono state differenze nel paziente, età, sesso, stadio pT, stato ECOG o stato del margine tra i pazienti con tumori amplificati e non amplificati. Inoltre, non c'erano differenze nelle caratteristiche morfologiche (caratteristiche nucleari o architettoniche) dei tumori con e senza amplificazione. La sopravvivenza a 5 anni specifica del cancro dei pazienti con carcinoma uroteliale micropapillare con amplificazione ERBB2 è stata dello 0%, a differenza dei pazienti con carcinoma uroteliale micropapillare senza amplificazione la cui sopravvivenza a 5 anni specifica del cancro era del 40% ( P <0, 001) (Figura 2 ). Non vi era alcuna differenza statisticamente significativa nella sopravvivenza specifica del cancro tra i pazienti con carcinoma uroteliale tipico con amplificazione e senza amplificazione (Figura 3). Le associazioni di caratteristiche cliniche e patologiche e l'amplificazione di ERBB2 con la sopravvivenza specifica del cancro sono riassunte nelle Tabelle 3 e 4. All'analisi univariata, l'amplificazione di ERBB2 è stata associata ad un rischio triplicato di morte per cancro alla vescica. All'analisi multivariata, l'amplificazione di ERBB2 (HR 4.3; P = 0.0008) e il punteggio ECOG (HR 2.2; P = 0.007) sono rimasti significativamente associati alla morte per cancro alla vescica.

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Un caso di carcinoma uroteliale micropapillare con amplificazione ERBB2 . La sonda rossa indica copie di ERBB2 ; la sonda verde indica il cromosoma 17 centromero.

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Sopravvivenza specifica del cancro di pazienti con carcinoma uroteliale micropapillare amplificato ERBB2 (MP UC) rispetto ai pazienti con carcinoma micropapillare non amplificato.

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Sopravvivenza specifica del cancro dei pazienti con carcinoma uroteliale tipico (UC) amplificato con ERBB2 rispetto ai pazienti con carcinoma uroteliale tipico non amplificato.

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Tabella a grandezza naturale

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I risultati di immunohistochemistry sono forniti nella Tabella 4 e illustrati nella Figura 4. Nei pazienti con carcinoma micropapillare e carcinoma uroteliale tipico, non vi era alcuna associazione significativa dei punteggi immunoistochimici con sopravvivenze specifiche del cancro quando si confrontavano i punteggi di colorazione dell'intensità 0, 1 rispetto a 2, 3 come in genere fatto nel carcinoma mammario. C'era una forte associazione di amplificazione ERBB2 e punteggi immunoistochimici ERBB2 2 e 3. Quindici (83%) dei 18 tumori della vescica che mostravano l'amplificazione ERBB2 avevano punteggi immunoistochimici ERBB2 di 2 e 3. Tre casi di cancro amplificato ERBB2 avevano un punteggio <2 . Tuttavia, i punteggi immunoistochimici 2 e 3 erano presenti in 39 (27%) su 143 pazienti con carcinoma micropapillare e carcinoma uroteliale che non avevano amplificazione ERBB2 .

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Carcinoma uroteliale micropapillare con punteggio ERBB2 di 3.

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Discussione

In questo studio condotto su pazienti affetti da cistectomia radicale, l'amplificazione di ERBB2 è stata significativamente associata a una ridotta sopravvivenza specifica per tumore tra i pazienti con carcinoma uroteliale micropapillare. A nostra conoscenza, ciò rappresenta la prima volta che l'amplificazione di ERBB2 è stata osservata per predire l'esito tra i pazienti con la rara variante del carcinoma uroteliale. Inoltre, questi risultati suggeriscono che la manipolazione terapeutica di ERBB2 può essere promettente per i pazienti che presentano un carcinoma uroteliale micropapillare aggressivo.

Il carcinoma uroteliale micropapillare è una variante insolita del carcinoma della vescica che comprende dallo 0, 7 al 6% di tutti i tumori della vescica. Fu inizialmente descritto nel 1994 e chiamato per la sua somiglianza con il carcinoma sieroso papillare dell'ovaio. 3 Diversi studi hanno suggerito che il carcinoma uroteliale micropapillare ha un decorso particolarmente aggressivo rispetto al carcinoma uroteliale tipico, ma questi studi sono stati limitati da un numero limitato di pazienti o da trattamenti e follow-up non standardizzati. Recentemente, abbiamo esaminato la nostra esperienza di carcinoma uroteliale micropapillare trattato con cistectomia radicale e mostrato che il carcinoma uroteliale micropapillare era associato con una diffusione locoregionale avanzata al momento dell'intervento rispetto ai pazienti con carcinoma uroteliale tipico. 9 Tuttavia, se abbinati allo stadio e ad altre caratteristiche clinicopatologiche prognostiche, i pazienti con carcinoma micropapillare hanno avuto lo stesso risultato dei pazienti con carcinoma uroteliale tipico. In questo studio, definiamo ulteriormente il comportamento del carcinoma uroteliale micropapillare e mostriamo che l'amplificazione ERBB2 identifica un gruppo di pazienti con esiti particolarmente avversi.

Sebbene questo studio richieda una validazione esterna, i nostri risultati hanno diverse importanti implicazioni cliniche. Per uno, la valutazione dello stato ERBB2 potrebbe fornire importanti informazioni prognostiche per i pazienti in esame per un intervento chirurgico. In un tumore che è stato ritenuto particolarmente aggressivo, l'assenza dell'amplificazione di ERBB2 suggerisce un risultato a seguito di cistectomia simile a pazienti con carcinoma uroteliale tipico a stadio simile. La presenza dell'amplificazione ERBB2 suggerisce anche una maggiore probabilità di coinvolgimento dei linfonodi che può alterare l'approccio chirurgico e una maggiore probabilità di progressione della malattia che influenzerebbe il trattamento e il follow-up perioperatori. Ci sono anche implicazioni per quanto riguarda la terapia mirata. Il ruolo di trastuzumab nel trattamento del carcinoma mammario è ben definito. Recentemente, è stato riportato un beneficio in termini di sopravvivenza nel carcinoma gastrico amplificato avanzato ERBB2 trattato con anticorpo monoclonale anti-EBBR2. 26 Esiste il potenziale che i pazienti con carcinoma della vescica amplificato con ERBB2 possano beneficiare della terapia con trastuzumab e che ci si possa aspettare che la frequenza di amplificazione sia più elevata nel carcinoma micropapillare rispetto al carcinoma uroteliale tipico. È importante notare che, sebbene relativamente basso, abbiamo rilevato una frequenza di amplificazione ERBB2 di circa il 9% nei tumori uroteliali tipici in modo simile ad altri studi. 16 Sebbene il numero di pazienti con carcinoma uroteliale tipico e amplificazione ERBB2 sia piccolo, non abbiamo identificato un risultato peggiore in questi pazienti rispetto ai pazienti che avevano tumori non amplificati. Sono necessari studi clinici per determinare l'efficacia della terapia anti-ERBB2 in questi pazienti e gli studi trarrebbero beneficio dalla revisione della patologia centrale per stratificare i pazienti in base al sottotipo di cancro alla vescica e gli studi richiederanno una valutazione standardizzata dello stato del tumore ERBB2 .

Come previsto, l'immunoistochimica per ERBB2 ha avuto un valore predittivo positivo relativamente alto per l'identificazione dei tumori della vescica che mostrano l'amplificazione di ERBB2 con 15 tumori 18 su 18 (83%) ERBB2 che mostrano una sovraespressione di ERBB2 alta (punteggio 2 e 3). Tuttavia, una grande percentuale di tumori con sovraespressione del punteggio 2 e 3 non ha mostrato l'amplificazione di ERBB2 (39 su 142 casi non amplificati). Non è noto il significato della sovraespressione di ERBB2 nei tumori non amplificati. Sarà importante in futuri studi clinici prospettici esplorare se ci sono potenziali benefici dal trastuzumab in pazienti non solo con tumori amplificati con ERBB2 ma anche in pazienti con tumori non amplificati con ERBB2 che mostrano sovraespressione di ERBB2. È da notare che non abbiamo identificato un'associazione tra sopravvivenza specifica del cancro ed espressione della proteina ERBB2 in pazienti con carcinoma uroteliale micropapillare o tipico.

Segnaliamo una frequenza inferiore di amplificazione ERBB2 nel carcinoma micropapillare rispetto ad altri gruppi. In particolare, Ching et al. 10 hanno riferito che 8 (42%) su 19 carcinomi micropapillari hanno mostrato amplificazione e 13 (68%) hanno mostrato punteggio 2 e 3 per immunoistochimica rispetto al 15% e al 50%, rispettivamente, nelle nostre serie. Inoltre, Ching et al. Non hanno trovato alcuna associazione tra amplificazione ERBB2 e risultati. Esistono diverse possibili spiegazioni per queste differenze. Lo studio di Ching et al ha valutato solo 20 pazienti, quattro che hanno ricevuto la resezione transuretrale come unico intervento chirurgico, mentre 16 sono stati sottoposti a cistectomia radicale. Quattordici (88%) dei 16 pazienti presentavano un coinvolgimento linfonodale regionale durante l'intervento chirurgico e i restanti due erano sospettati di avere un coinvolgimento basato sulla radiologia e 12 dei loro pazienti sono deceduti per un follow-up di 14 mesi. Nella nostra serie, 32 (52%) pazienti con carcinoma micropapillare avevano un coinvolgimento linfonodale regionale e i pazienti con coinvolgimento linfonodale avevano una frequenza più elevata di amplificazione ERBB2 . Dei 9 pazienti con tumori ERBB2 amplificati, 7 (78%) avevano un coinvolgimento linfonodale regionale rispetto a 25 (48%) di 52 pazienti con tumori non amplificati. Questi risultati suggeriscono che lo studio di Ching et al consisteva in pazienti con malattia più avanzata e, di conseguenza, le loro serie hanno mostrato una frequenza più elevata di amplificazione ERBB2 . C'erano anche differenze nella metodologia tra i due studi. Ching et al. Hanno utilizzato una tecnica di ibridazione cromagica in situ modificata applicata ai microarrays tissutali in contrasto con la tecnica FISH approvata dalla FDA eseguita su intere sezioni di tumore nella nostra analisi. Infine, Ching et al hanno eseguito l'immunoistochimica con un anticorpo primario di Ventana mentre abbiamo utilizzato l'Herceptest approvato dalla FDA di Dako. È difficile valutare l'impatto di queste diverse metodologie sui risultati, ma queste differenze sottolineano la necessità di un approccio standardizzato per determinare l'amplificazione di ERBB2 negli studi clinici.

Ci sono diverse limitazioni a questo studio. Sebbene il numero di pazienti sottoposti a cistectomia radicale per carcinoma uroteliale micropapillare sia relativamente elevato rispetto ad altri studi, rimane piuttosto limitato. Inoltre, lo studio era retrospettivo e non randomizzato. Pertanto, i nostri risultati richiederanno la convalida tramite un ampio studio retrospettivo multiistituzionale o preferibilmente attraverso una sperimentazione clinica prospettica che esamina il significato prognostico dell'amplificazione ERBB2 e l'applicazione della terapia mirata nel contesto della cistectomia.